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      關于細胞培養知識分享

      來源: 上海西格生物科技有限公司 >> 進入該公司展臺 2021/06/22 10:24:05 已瀏覽:
      導讀:關于細胞培養知識分享

      一、細胞培養的基本概念


          體外培養(in vitro culture)包括有結構層次的培養,即:組織培養(tissue culture)、細胞培養(cell culture)和器官培養(organ culture)。

      細胞培養(Cell culture)指從生物機體取出部分組織分散成單個細胞或直接從機體取出單個細胞,也可把體外培養細胞分散成單個細胞在體外條件下培養,細胞能繼續存活與增殖。


      二、細胞培養目的與用途

      1、科學研究

      (1)藥物研究開發,如新藥篩選,疫苗、基因工程藥物、細胞工程藥物研究與開發、單克隆抗體制備等。

      (2)基礎研究,如藥物作用機理、基因功能、疾病發生機理等研究。

      2、生物制藥

      (1)疫苗生產:如病毒性疫苗(肝炎病毒疫苗、艾滋病疫苗等),多肽疫苗(腫瘤疫苗)等。

      (2)基因工程藥物生產:如EPO等。

      (3)抗體藥物、基因治療藥物生產。

      (4)細胞工程藥物生產:生物細胞內的一些生物活性多肽,生物活性物質等。

      (5)利用細胞法體外測定生物活性物質的活性;并預測其在體內的藥效和替代體內法檢測其成品的生物活性。


      三、原代培養和傳代培養

            原代培養(primary culture):將動物機體的各種組織從機體中取出,經各種酶(常用胰蛋白酶)、螯合劑(常用EDTA)或機械方法處理,分散成單細胞,置合適的培養基中培養,使細胞得以生存、生長和繁殖,這一過程稱原代培養。

      但實際上,通常把第yi代至第十代以內的培養細胞統稱為原代細胞培養。

      傳代培養(subculture):細胞在培養器皿中生長一定時間后,被分開接種到新的培養器皿中。

          當原代培養*以后,隨著培養時間的延長和細胞不斷分裂,一則細胞之間相互接觸而發生接觸性抑制,生長速度減慢甚至停止;另一方面也會因營養物不足和代謝物積累而不利于生長或發生中毒。此時就需要將培養物分割成小的部分,重新接種到另外的培養器皿(瓶)內,再進行培養。

      對單層培養而言,80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段。


      四、體外培養細胞的方式

           群體培養(mass culture),將含有一定數量細胞的懸液置于培養瓶中,讓細胞貼壁生長,匯合(confluence)后形成均勻的單細胞層;

      克隆培養(clonal culture),將高度稀釋的游離細胞懸液加入培養瓶中,各個細胞貼壁后,彼此距離較遠,經過生長增殖每一個細胞形成一個細胞集落,稱為克?。╟lone)。一個細胞克隆中的有細胞均來源于同一個祖先細胞。


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